基本原理:吸收光酶標(biāo)儀的工作原理是基于物質(zhì)對(duì)特定波長(zhǎng)光的吸收特性進(jìn)行定量分析。當(dāng)特定波長(zhǎng)的光通過(guò)樣品時(shí),樣品中的分子會(huì)吸收部分光能量,剩余的光能量通過(guò)檢測(cè)器被測(cè)量。通過(guò)比較樣品對(duì)光的吸收程度,可以推算出樣品中目標(biāo)物質(zhì)的濃度。
朗伯-比爾定律:吸收光酶標(biāo)儀的檢測(cè)基于朗伯-比爾定律(Lambert-Beer Law),該定律表明,在一定條件下,樣品對(duì)光的吸收強(qiáng)度與樣品濃度成正比關(guān)系。
光源與濾光片:酶標(biāo)儀的光源通常為氙燈或鹵素?zé)?,發(fā)出的光經(jīng)過(guò)濾光片或單色器后變成單色光,再照射到樣品上。濾光片的選擇非常重要,因?yàn)椴煌ㄩL(zhǎng)的光對(duì)應(yīng)不同的檢測(cè)需求。
檢測(cè)器:光線經(jīng)過(guò)樣品后,部分被吸收,部分透過(guò)。透過(guò)的光線被檢測(cè)器(如光電倍增管或光電二極管)捕捉并轉(zhuǎn)換為電信號(hào)。這些信號(hào)經(jīng)過(guò)放大和處理后,轉(zhuǎn)化為吸光度值。
數(shù)據(jù)處理:酶標(biāo)儀通過(guò)計(jì)算吸光度值(OD值)來(lái)確定樣品中目標(biāo)物質(zhì)的濃度。OD值是吸光度與透光度的差值,通常用于定量分析。
應(yīng)用范圍:吸收光酶標(biāo)儀廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究、藥物研發(fā)、臨床實(shí)驗(yàn)以及食品安全檢測(cè)等領(lǐng)域。它主要用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、蛋白質(zhì)濃度測(cè)定、細(xì)胞增殖和毒性檢測(cè)等。
技術(shù)特點(diǎn):精度:現(xiàn)代酶標(biāo)儀具有高精度的光學(xué)檢測(cè)能力,能夠進(jìn)行多種類型的酶促反應(yīng)分析。多功能性:除了吸收光檢測(cè)外,一些高級(jí)酶標(biāo)儀還支持熒光檢測(cè)、化學(xué)發(fā)光檢測(cè)等多種功能。自動(dòng)化:許多酶標(biāo)儀集成了自動(dòng)進(jìn)樣、清洗和數(shù)據(jù)處理功能,減少了人工操作步驟。